使用点成LUNA-III™自动细胞计数仪进行精准细胞尺寸测量
关键词:LUNA-III™ 自动细胞计数仪,NIST 可溯源粒径标准,细胞尺寸测量,尺寸分选
1 引言
细胞尺寸是生物医学研究及生物制造等应用中的关键参数,可反映细胞健康状况与质量。在生物制造流程中,细胞尺寸用于评估批次培养或细胞治疗中的原料质量,因此自动细胞计数仪的精准测量至关重要。LUNA-III™自动细胞计数仪 继承了 LUNA™ 系列设备的标准尺寸分选功能,确保高精度细胞尺寸测量,并能在计数过程中及计数后对细胞群体进行分类分析。本研究展示了LUNA-III™自动细胞计数仪在六种NIST可溯源粒径标准及3T3 细胞系上的测量精度和尺寸分选能力。
2 方法与材料
2.1 细胞系与试剂
实验使用3T3细胞系,其培养基为含10%胎牛血清和1%的DMEM。细胞存活率评估采用0.4%台盼蓝(货号 T13101)。此外为了验证尺寸测量的精度,实验使用了六种NIST可溯源粒径标准(9.98、20.85、30.04、43.33、50.00和57.43 µm)。
2.2 基于NIST可溯源粒径标准的精度验证
NIST可溯源粒径标准由美国国家标准与技术研究院(NIST)提供,可作为的测量基准。使用这些标准颗粒评估LUNA-III™自动细胞计数仪的测量精度,结果表明其尺寸测量准确度达 95.2% 以上,进一步验证了其在尺寸测量中的高精度(图1)。

图 1:(A)LUNA-III™自动细胞计数仪计数的NIST可溯源粒径标准(NT27N、NT30N、NT32N、NT33N、NT34N、#64200)图像,红色圆圈标示检测出的颗粒。(B)表格对比NIST标准粒径尺寸与点成LUNA-III™测量值及其精度百分比。(C)散点图显示了LUNA-III™自动细胞计数仪测量值与NIST标准值的线性关系,R²值达0.9999,表明其具备的线性度和准确性。
2.3 细胞尺寸测量
为了评估LUNA-III™自动细胞计数仪的尺寸测量准确性,我们混合了六种NIST可溯源粒径样本,并将计数范围设定在 1 µm 至 90 µm 之间。计数完成后,系统生成细胞浓度与尺寸分布直方图,并精准分类各尺寸标准颗粒。利用灵活的尺寸分选功能,可在计数后立即调整尺寸范围,对目标尺寸进行精确标定,使测量准确度超过98%。

图 2:LUNA-III™自动细胞计数仪在不同尺寸范围(8~12 µm、18~22 µm、28~32 µm、41~45 µm、48~52 µm、55~59 µm)内对NIST标准颗粒进行检测与尺寸分选的示例图,每个图像均配有相应的直方图,以展示粒径分布情况。
2.4 3T3 细胞尺寸测量
为了评估LUNA-III™自动细胞计数仪根据尺寸筛选3T3细胞(已知尺寸约18 µm)的能力,我们设定了多个尺寸分选范围7~24 µm、1~11 µm、12~24 µm、16~20 µm(图 3)。结果显示,LUNA-III™自动细胞计数仪能精准检测并筛选符合各尺寸范围的3T3细胞,同时相应的直方图也清晰展示了细胞尺寸分布情况,证明其在不同尺寸范围内均能实现可靠、精准的测量。

图 3:LUNA-III™自动细胞计数仪计数的3T3细胞图像,显示细胞在 7~24 µm、1~11 µm、12~24 µm和16~20 µm之间的尺寸分选情况,橙色圆圈标示检测到的细胞。相应直方图展示了各尺寸范围内的细胞分布情况。
3 结论
LUNA-III™自动细胞计数仪可提供精准、可靠的细胞尺寸测量。在NIST可溯源粒径标准的验证下,其测量准确度达95.2%以上,并成功对混合粒径颗粒及3T3细胞进行精准分类和尺寸分选,准确度超过98%。
LUNA-III™自动细胞计数仪具备以下优势:
l 精准测量:适用于各种颗粒尺寸和细胞类型
l 可靠分选:确保细胞群体的精确分类
l 高重复性:测量结果一致性强
这些优势使LUNA-III™自动细胞计数仪成为细胞尺寸、健康状况和质量评估的理想工具。
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